Un spectrophotomètre est un instrument permettant de réaliser une mesure spectrophotométrique[1]. Un spectromètre, ou spectroscope, est un appareil qui permet d’effectuer une mesure spectrométrique de l’absorbance d’une solution à une longueur d’onde donnée ou sur une région donnée du spectre.
En biologie
Le spectromètre est utilisé lors de la réalisation du test MTT.
En biologie moléculaire, il est utilisé lors de l’extraction d’ADN, pour quantifier l’ADN et déterminer sa pureté. On utilise la longueur d’onde 260 nm qui est la zone d’absorbance maximale des acides nucléiques. Une seconde mesure à 280 nm permet de contrôler la pureté de l’extraction, à savoir la présence de protéines résiduelles dans la solution d’ADN.
En biochimie, il est utilisé lors de la purification de protéines, pour les quantifier (longueur d’onde 280 nm) et déterminer leur niveau de pureté (longueur d’onde 260 nm).
En médecine Modifier
L’analyse cinétique de différentes enzymes sanguines, dosage de la phosphatase alcaline : cholestase, lactate déshydrogénase : infarctus du myocarde, hémolyse.
En physique Modifier
L’analyse de la lumière permet de déterminer les composants chimiques à l’origine de l’émission lumineuse : par exemple, la composition chimique des étoiles.
En chimie Modifier
L’analyse de l’absorption des solutions à une longueur d’onde donnée permet le dosage de ces solutions selon la loi de Beer-Lambert (la concentration est proportionnelle au logarithme de l’absorption lumineuse). Il y a donc relation directe entre la quantité de lumière absorbée et la concentration en composé chimique de la solution. Le suivi dans le temps de l’absorption est une méthode de caractérisation de la vitesse de réactions chimiques (cinétique).
Un balayage en fréquence permet de caractériser l’espèce présente en solution en remontant à la nature de la transition énergétique considérée.
Dans les industries graphiques Modifier
Il permet de mesurer les couleurs afin de calibrer des périphériques de sortie tels que les traceurs.
Georges Bruhat, Optique, sixième édition, collection les cours de référence, Dunod, 2005, 1152 p.